PURIFICACIÓN Y CARACTERIZACIÓN BIOQUIMÍCA Y FARMALÓGICA DE TOXINAS PROCEDENTES DE VENENO DE SERPIENTES

OBJETIVOS

• Mostrar a la cromatografía liquida convencional y de alta eficiencia  así como sus  variantes o tipos, como método para la separación de los componentes del veneno de serpientes como instrumento valioso en la discriminación de los componentes presentes en los venenos.
• Conocer los diversos procedimientos en los análisis físico-químicos  en la caracterización de las biomoléculas presentes en los venenos de serpientes.
• Mostrar las diversas caracterizaciones de farmacología experimental para el análisis de cada uno de los componentes presentes en los veneno de serpientes.
• Incentivar la investigación básica en el área toxicológica como elemento fundamental para una ciencia aplicada en el desarrollo biotecnológico.

SUMILLA DE CONTENIDOS.

TEÓRICO

Métodos de estudio de las proteínas

• Purificación de proteínas y enzimas: Fundamentos, principios y aplicaciones.
• Cromatografía liquida Tipos: Cromatografía convencional.
• Cromatografía de alta performance.  Cromatografía de exclusión molecular. Cromatografía de intercambio iónico. Cromatografía de afinidad. Cromatografía de interacción hidrofóbica. Cromatografía de fase reversa.
• Electroforesis: Fundamentos, principios y aplicaciones. Electroforesis 2D.
• Secuenciamiento de Proteínas: Fundamentos, principios y aplicaciones.
• Degradación de Edman. Sistema Procise ( Waters ). 
• Espectrometría de masa: Fundamentos, principios y aplicaciones.   

Biotecnología de proteínas como modelos biológicos.

• Toxinas de veneno de serpientes, arañas, escorpiones
• Proteínas de origen vegetal.

PRÁCTICO

• Purificación de Toxinas en sistemas   de Cromatografía liquida convencional;
• Cromatografía de exclusión Molecular
• Cromatografía de Intercambio Ionico
• Electroforesis
• Electrolisis en SDS PAGE     
• Estudios calorimétricos
• Farmacología Experimental en venenos
• Análisis de la actividad inflamatoria (Edema de pata)
• Análisis de la actividad Coagulante (Fibrinogenolitica )
• Análisis de la actividad hemorrágica ( Metaloproteasa)
• Letalidad de los venenos ofídicos (Dosis Letal media) DL50 

       

EVALUACIÓN

Los participantes expondrán trabajos publicados en el área toxinologica de relevancia internacional

RESPONSABLES

Prof. Luis Alberto Ponce Soto Ph.D.

Docente Credenciado del Departamento de Bioquímica – Instituto de Biología de la Universidad Estatal de Campinas – Brasil.

Colaboradores:

Augusto Vilca Quispe  

Doctorando del Laboratorio de Quimica de Proteinas Instituto de Biologia Universidad Estatal de Campinas

José Antonio Valeriano Zapana     

Maestrando del Laboratorio de Quimica de Proteinas Instituto de Biologia Universidad Estatal de Campinas

METAS DEL PARTICIPANTE Y TASA EDUCATIVA

Limitadas

CALENDARIO PARA EL DESARROLLO DEL EVENTO

Duración: 5 días útiles

PAGO AL PONENTE

Por establecer

INFRAESTRUCTURA.

Los requerimientos de materiales son:

FÍSICO-QUÍMICOS:

EQUIPOS

• Cámara de electroforesis de proteínas
• Columnas de cromatografía convencional
• Espectrofotómetro

REACTIVOS

• Resinas (Sephadex G-75 e intercambio ionico)
• Marcadores de masa  molecular para electroforesis SDS-page
• Marcadores de masa molecular para columna cromatográfica
• Reactivos para electroforesis de proteínas.
• Fibrinogeno bovino.
• Dimetil sulfoxido (DMSO) o acetonitrilo.

BIOLÓGICOS

EQUIPOS Y REACTIVOS

• Kit de creatinokinasa (intramuscular)
• Capilares de 80ul heparinizados
• Centrifuga de capilares
• Jeringas hipodérmicas de 300 ul de volumen  
• Guantes quirúrgicos
• Equipo de disección
• Xilol
• Pleisrtometro o medidor de inflamacion de edema de pata (RATON)
• Jaulas
• Algodon
• Alcohol

ANIMALES

• Ratones de 18 a 20 gr de peso
• Numero de ratones estará en función de los grupos a establecer

OTROS

• Software Origin para análisis de resultados.

COSTO:

Estudiantes: S/. 200.00

Profesionales: S/. 250.00